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发表于 2024-7-1 15:35:02
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二、实验原理
（一）转化
● 将低温保存的氯化钙法制备的大肠杆菌感受态细胞在冰浴融
化。加入用于转化的质粒DNA后，转化混合物将形成抗
DNase的羟基—钙磷酸复合物黏附于细胞表面。42℃短暂热
击可促进细胞吸收DNA复合物。
● 加入丰富培养基后，大肠杆菌细胞恢复正常状态并开始分裂
复制。在质粒DNA相应的抗性培养条件下，质粒DNA随着细
胞的扩增而扩增。
● 用此方法制备的感受态细菌每微克超螺旋质粒DNA可以得到
5X106到2X107的克隆。这种转化效率已经完全可以满足常规
的质粒克隆的要求 。
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